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    Luigi SAPIO

    Insegnamento di TECNICHE DI BIOCHIMICA CLINICA

    Corso di laurea in TECNICHE DI LABORATORIO BIOMEDICO (ABILITANTE ALLA PROFESSIONE SANITARIA DI TECNICO DI LABORATORIO BIOMEDICO)

    SSD: BIO/12

    CFU: 2,00

    ORE PER UNITÀ DIDATTICA: 20,00

    Periodo di Erogazione: Primo Semestre

    Italiano

    Lingua di insegnamento

    Italiano

    Contenuti

    Principi e applicazioni delle tecniche analitiche impiegate nella determinazione dei parametri di maggiore rilevanza in Biochimica Clinica.

    Testi di riferimento

    Principi e Tecniche di chimica clinica. Luigi Spandrio. PICCIN Editore (ISBN: 9788829915699).

    Tecniche di biochimica clinica. Valerio Anna. CLEUP Editore (ISBN: 9788861292727).

    Biochimica Clinica e Medicina di Laboratorio. Marcello Ciaccio, Giuseppe Lippi. EdiSES Editore (ISBN: 9788833190129).

    Obiettivi formativi

    L’insegnamento si propone di fornire le nozioni essenziali, nonché gli strumenti conoscitivi e applicativi, necessari per comprendere le metodologie impiegate nella determinazione dei principali parametri analitici in Biochimica Clinica.

    Prerequisiti

    Per sostenere l’esame è necessario aver superato la seguente propedeuticità in ingresso: CHIMICA E BIOCHIMICA, FONDAMENTI PRELIMINARI ALLA PRATICA PROFESSIONARE.

    Metodologie didattiche

    Lezioni frontali con l’ausilio di strumenti multimediali e discussione degli argomenti trattati.

    Metodi di valutazione

    La verifica dell’apprendimento sarà effettuato mediante esame orale finale, con votazione in trentesimi. La media aritmetica dei moduli che compongono il corso integrato di BASI E APPLICAZIONI DELLE TECNICHE ANALITICHE determinerà invece il voto finale.

    Altre informazioni

    Per chiarimenti e problematiche inerenti agli argomenti dell'insegnamento, gli studenti possono rivolgersi direttamente al docente di riferimento, secondo le modalità indicate nella relativa pagina web.

    Programma del corso

    • Introduzione alle tecniche analitiche. Definizione e determinazione della Precisione, Accuratezza e Esattezza. Limite del Bianco, Sensibilità, Rilevabilità e Quantificazione.
    • Spettrometria e spettrofotometria: principi analitici e strumentazioni. Trasmittanza e Assorbanza. Legge di Lambert-Beer. Retta di taratura e curva di calibrazione. Le determinazioni colorimetriche dirette e indirette: analisi quantitativa delle proteine sieriche. Il sistema NAD/NADH come metodo di rilevazione enzimatiche: dosaggio del Glucosio, LDH e CK.
    • Turbidimetria e Nefelometria: tecniche e applicazioni in Biochimica Clinica.
    • Principi chimico-fisici dell’elettroforesi. Le proteine come sostanze anfotere. Concetto di punto isoelettrico e mobilità elettroforetica. Struttura e composizione delle proteine: relativo impatto sulla migrazione. Forza ionica, temperatura ed elettroendosmosi. Elettroforesi delle proteine (QPE). Analogie e differenze analitiche tra acetato di cellulosa, gel di agarosio e elettroforesi capillare. Elettroforesi dell’emoglobina ed emoglobinopatie.
    • L’esame emocromocitometrico. L’impedenziometria e il principio di Coulter. Parametri diretti e indiretti del canale RBC/PLT. Dosaggio dell’emoglobina: metodi con cianuri e senza cianuri (SDS). Principali interferenze nella determinazione degli indici eritrocitari. La citometria e la citofluorimetria in Biochimica Clinica. Reticolociti, Frammenti Eritrocitari e Piastrine Giganti. Formula leucocitaria e analizzatori automatici: il sistema Coulter, Advia e Sysmex a confronto. L’analisi dei sedimenti urinari come ulteriore esempio applicativo della citofluorimetria in Biochimica Clinica.

    English

    Teaching language

    Italian

    Contents

    Principles and Applications of the analytic techniques used in Clinical Biochemistry to estimate some of the most important clinical parameters in human biological fluids.

    Textbook and course materials

    Clinical Biochemistry. Nessar Ahmed. Oxford University Press (ISBN: 9780199674442).

    Clinical Biochemistry & Metabolic Medicine. Martin Andrew Crook. Routledge (ISBN: 9781444144147).

    Course objectives

    This course has been conceived to provide essential knowledge on principles and applications of the techniques employed in Clinical Biochemistry to determine the most common analytical parameters.

    Prerequisites

    As expressly requested by the Degree Program Board in Biomedical Laboratory Techniques, to attend the course students have to pass the entry examination in “CHEMISTRY AND BIOCHEMISTRY, PRELIMINARY BASICS TO THE PROFESSIONAL PRACTICE”.

    Teaching methods

    Lectures in Italian by using multimedia tools. Round table on selected syllabus-related topics will be defined together with the course students.

    Evaluation methods

    To pass the exam students need to prove an adequate knowledge of the whole syllabus by oral presentation.

    Other information

    Students can directly reach the designed Teacher for any clarification or further explanation. Additional contact details are indicated at the Page of the Appointed Teaching Professor.

    Course Syllabus

    • Introduction to the analytic techniques in Clinical Biochemistry. Precision, accuracy and exactness. Blank, sensitivity, detection and quantification limits.
    • Spectrometry and spectrophotometry: principle, equipment and applications in Clinical Biochemistry. Measurement of transmittance and absorbance in biological samples. The Beer-Lambert Law. Calibration and Sizing Curves. Direct and indirect colorimetric reactions used in spectrometry. The role of NAD/NADH system in the enzymatic determinations. Measurement of blood glucose, LDH and CK.
    • Nephelometry and turbidimetry in Clinical Biochemistry: a different way to detects light/sample interactions.
    • Electrophoresis. Proteins: amphoteric molecule, isoelectric point and electrophoretic mobility. Protein domains: biological functions and properties in migration. Role of ionic strength, temperature and EEO in the electric field induced protein separation. Similarities and differences among cellulose acetate, agarose gel and capillary electrophoresis. Hemoglobin electrophoresis and Haemoglobinopathies.
    • The complete blood count (CBC). The Coulter Principle and the RBC/PLT channel. Measurement of blood hemoglobin concentration by cyanuric and non-cyanuric (SDS) methods. The employment of Flow Cytometry to discriminate reticulocytes, giant platelets and red cell fragments. Normal CBC and differential: a comparative analysis among Coulter, Advia e Sysmex equipment. The fully quantitative urine sediment analysis as an additional example of the Flow Cytometry application in Clinical Biochemistry.

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